HPVinfo.ru - папиллома и вирус папилломы человека
30.08.2010

Тест-системы для выявления любых штаммов ВПЧ

Количественная ПЦР (полимеразная цепная реакция) тест-система на основе красителя Sybr Green

Уильям Т. Симен (William T Seaman), Элизабет Эндрюс (Elizabeth Andrews), Мэрион Коуч (Marion Couch), Эрна М. Коич (Erna M Kojic), Сьюзан Кью-Авин (Susan Cu-Uvin), Джоэл Палефски (Joel Palefsky), Элисон М. Дил (Allison M Deal) и Дженнифер Вебстер-Сириак (Jennifer Webster-Cyriaque).

Предпосылки.

Папилломавирус человека представляет собой серьезную проблему для человеческого здоровья, поскольку он провоцирует появление аногенитальных и оральных форм рака, а также остроконечных кондилом. Хотя выявлено более 100 типов ВПЧ, лишь некоторые из них становятся причиной предраковых и раковых поражений. Наиболее распространенными онкогенными типами ВПЧ являются 16 и 18, аногенитальные остроконечные кондиломы чаще всего вызваны 6 и 11 типами. Количественные ПЦР тест-системы применяются для обнаружения онкогенных типов ВПЧ, но не существует методики анализа in vitro, которая бы выявляла наиболее распространенные онкогенные штаммы и штаммы, вызывающие кондиломы.

Результаты.

Была разработанная количественная ПЦР (полимеразная цепная реакция) тест-система на основе красителя Sybr Green с использованием «вырожденных» праймеров для высококонсервативного белка ВПЧ Е1. Теоретически эта тест-система способна выявить любой штамм ВПЧ. Также была разработана однопробирочная мультиплексная количественная ПЦР тест-система с применением типоспецифических пар праймеров и проб TaqMan. Данная тест-система позволяет выявить 6, 11, 16 и 18 типы ВПЧ, а также провести для них количественный анализ. Материалом для исследования послужили 140 злокачественных и доброкачественных образцов, взятых из аногенитальной области, с поверхности кожи и из ротовой полости. Каждый тип ВПЧ был выявлен при концентрации от 2х101 до 2х106 копий в реакцию. Таким образом, была создана надежная методика произведения количественного типоспецифичного анализа для выявления ВПЧ. Были обнаружены 35 онкогенных типов ВПЧ и штаммов низкого риска. Было установлено соответствие результатов с данными проведенных ранее анализов образцов. Сравнение с золотым стандартом показало, что итоговая чувствительность – 89% (95% доверительный интервал: 77%-96%), специфичность – 90% (95% доверительный интервал: 52% - 98%).

Заключение.

При анализе злокачественных образований наблюдалось соответствие между результатами, полученными с использованием описанных выше количественных ПЦР тест-систем, и результатами анализов по стандартным методикам. Введение инновационных количественных ПЦР тест-систем ускорит выявление ВПЧ и проведение количественного анализа, что позволит установить роль различных штаммов в вирусном патеногенезе.






Самые свежие новости:

Что делать, если у вас обнаружили вирус папилломы?
Форум специалистов в области лечения и профилактики папилломы.
  Copyright 2010 Посетите эти сайты: Курорт КраинкаКурорт Краинка Гипохлорит натрияГипохлорит натрия Лечение герпесаЛечение герпеса